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适用于shRNA表达研究的克隆载体构建
目的:建立一种适用于shRNA表达研究的克隆载体.方法:通过PCR扩增一段含有自杀基因ccdB和卡那霉素抗性基因的DNA序列.将其双酶切后克隆至shRNA表达载体pSilencer3.1-H1 neo中,得到重组体pSilencer3.1-ccdB.运用此重组体构建荧光素酶的shRNA表达载体并设立对照进行非重组背景的结果比较.结果:成功建立了pSilencer3.1-ccdB克隆载体.应用此载体构建荧光素酶的shRNA的表达载体,结果显示完全消除了非重组背景.结论:建立了适用于shRNA表达研究的克隆载体,为进一步研究siRNA的基因功能奠定了基础.
