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蛋白激酶PLK4对人脑胶质瘤增殖的影响
目的:分析蛋白激酶PLK4表达与胶质母细胞瘤患者预后相关性以及对人胶质瘤细胞增殖活性的影响.方法:基于CGGA数据库评估PLK4表达与胶质瘤患者病理级别和预后的关系;构建靶向PLK4基因的小分子干扰RNA,运用qPCR和Western blot法检测转染效率;利用MTT和平板克隆形成实验评价PLK4对肿瘤细胞增殖活性的影响.结果:PLK4的表达水平随样本病理级别的上升而增加,并且与胶质瘤患者总生存期和高级别胶质瘤患者的预后紧密相关;MTT和平板克隆形成实验结果显示敲低PLK4表达后肿瘤细胞增殖能力明显减弱.结论:PLK4的表达与胶质瘤患者的预后紧密相关,并能够影响肿瘤细胞的增殖活性.因此,PLK4可能是胶质瘤治疗的潜在靶点.
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宫颈癌组织中miRNA-34c的表达水平分析及其靶基因PLK4的鉴定
目的:分析miRNA-34c在宫颈癌组织中的表达水平并鉴定其新的靶基因.方法:利用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测甘肃省妇幼保健医院34例宫颈癌和癌旁正常组织中miRNA-34c表达水平.利用miRNA靶基因预测数据库预测miRNA-34c新的靶基因Polo样激酶4(PLK4).将含有PLK4的3'UTR片段荧光素酶载体分别与miRNA-34c模拟物或阴性对照共转染HEK293T细胞,并检测其荧光素酶活性.在人宫颈癌细胞SiHa细胞中分别转染miRNA-34c模拟物或阴性对照,利用qRT-PCR法和Western blot法分别检测靶基因的mRNA和蛋白质的表达水平.结果:与癌旁正常组织相比,miRNA-34c在宫颈癌组织中表达下调.在HEK293T细胞中,miRNA-34c模拟物显著抑制荧光素酶的活性(P<0.01).miRNA-34c模拟物显著下调SiHa细胞中PLK4的mRNA和蛋白质的表达(P<0.01).结论:miRNA-34c在人宫颈癌组织中表达下调,且能与PLK4的3'UTR结合并下调其mRNA和蛋白质的表达.
