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人肝细胞生长因子基因文献资料
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人肝细胞生长因子基因表达质粒的构建及其活性研究
目的:构建一种携带人肝细胞生长因子(HGF)基因的表达质粒(pUDKH),并对其体外活性进行研究,为其体内应用提供依据.方法:从人胎盘cDNA文库用PCR方法克隆人HGF基因,并将其克隆至自行构建的真核表达载体pUDK上,获得表达质粒pUDKH.将pUDKH体外转染原代培养的骨骼肌细胞,分析其转染效率及表达上清中HGF、血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平,并采用MTT法分析不同剂量HGF表达产物对人脐静脉内皮细胞的作用.结果:所克隆构建的携带人HGF基因的质粒pUDKH可有效转染原代培养的骨骼肌细胞(0.057%),并表达HGF(16～18 ng/4×105 cells)和VEGF,其表达产物对人脐静脉内皮细胞具有明显的增殖刺激活性(P<0.05),而且有剂量效应关系.结论:初步证实本研究构建的质粒pUDKH具有体内治疗缺血性疾病的应用潜力.
关键词： 人肝细胞生长因子基因 质粒载体 构建 表达产物 活性
