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牛乳铁蛋白素对Jurkat细胞和HFL-I细胞生物学特性的影响
目的 形态学观察牛乳铁蛋白素(LfcinB)对Jurkat细胞与人胚肺成纤维(HFL-I)细胞作用的程度,验证LfcinB诱导Jurkat细胞凋亡信号转导通路.方法 用荧光显微镜观察Hoechst33258染色LfcinB处理过的Jurkat细胞和正常成纤维细胞,与阴、阳性对照组比较;用DNA断裂琼脂糖凝胶电泳分析LfcinB对Jurkat和HFL-I细胞作用差异;用流式细胞术分析Jurkat细胞早期凋亡和线粒体电势电位状况;Western blotting研究Jurkat细胞接触LfcinB 4、6和8 h细胞内caspase-3、caspase-8、caspase-9和胞浆中细胞色素C含量的变化.结果 在LfcinB作用Jurkat细胞DNA断裂琼脂糖凝胶电泳图中显示为阶梯状凋亡DNA Ladder,而LfcinB作用的HFL-I细胞无此现象;在荧光显微镜可以看到LfcinB作用过的Jurkat细胞经Hoechst33258染色细胞核呈致密浓染和HFL-I细胞的细胞核呈均匀染色;流式术分析结果为LfcinB作用Jurkat细胞2、4h的凋亡率分别为11.5%和17.8%,线粒体膜电位下降;caspase-3、caspase-9和细胞色素C的免疫印记分析显示,LfcinB能使Jurkat细胞胞浆中的细胞色素C含量增加,被激活caspase-3、caspase-9在胞浆中逐渐增多,对caspase-8没有影响.结论 LfcinB诱导Jurkat细胞凋亡,对正常成纤维细胞没有作用;Jurkat细胞接触LfcinB 2 h以后细胞内caspase-3、caspase-9和胞浆中细胞色素C的含量累积增加,验证了LfcinB通过依赖caspase家族的细胞内信号通路诱导Jurkat细胞凋亡.
关键词： 牛乳铁蛋白素 durkat细胞 细胞凋亡 线粒体膜电位(△Ψm) -
神经酰胺诱导结肠癌HT-29细胞凋亡与线粒体膜电位变化的关系
目的 探索神经酰胺(C2-ceramide,C2-cer)对人结肠癌HT-29细胞增殖、线粒体膜电位改变、细胞凋亡等的影响.方法 正常培养的HT-29细胞分为C2-cer处理组与非处理组,用MTT法、流式细胞仪等方法观察不同时间C2-cer对细胞增殖、线粒体膜电位改变、细胞凋亡等的影响.结果 加入C2-cer可引起HT-29细胞线粒体膜电位 (△Ψm)下降,细胞增殖受抑,并导致细胞凋亡.上述效应与C2-cer剂量以及作用时间相关.结论 C2-cer可导致HT-29细胞线粒体膜电位(△Ψm)下降,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡.
关键词： 神经酰胺 HT-29细胞 线粒体膜电位(△Ψm) 细胞凋亡
