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弓形虫 棒状体蛋白1 DNA免疫 基因佐剂 pcIFN-γ文献资料
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pcROP1联合pcIFN-γ基因佐剂抗弓形虫DNA在小鼠体内的免疫应答
目的 构建IFN-γ基因真核表达重组质粒作为基因佐剂，观察其与pcDNA3-ROP1（pc-ROP1）重组质粒DNA共同免疫小鼠所诱导抗弓形虫免疫应答。 方法 将IFN-γ基因片段定向插入真核表达载体pcDNA3，双酶切鉴定，获得pcIFN重组子；碱裂解法大量制备，经肌肉免疫BALB/c小鼠，每只小鼠注射pcIFN 和pc-ROP1各100μg，两周后同量加强免疫一次，以pcDNA3空质粒和生理盐水组作对照。分别于免疫后第30天、50天和70天共三次用MTT法测定小鼠脾脏T淋巴细胞增殖活性及NK细胞活性；双夹心ELISA法测定血清细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-10和酶标测定NO含量；ELISA法测定IgG抗体滴度。结果 构建成功pcIFN重组质粒；pc-ROP1质粒DNA可刺激免疫鼠脾T淋巴细胞增生及NK细胞杀伤活性，在pcIFN的作用下，该两项指标皆明显增高，且IFN-γ、IL-2及NO水平较不加佐剂组明显提高（P<0.01），而对IgG抗体滴度无显著影响（P>0.05）。结论 IFN-γ基因佐剂具有协同pcROP1 DNA免疫的作用，可增强免疫鼠细胞免疫应答、IFN-γ、IL-2细胞因子及NO的产生。
