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  • 人M961全长cDNA及剪接异构体的分离与克隆

    作者:张斌;汪俊华;陶波;李光涛;周严;彭小忠;袁建刚;强伯勤

    目的分离、克隆人M96基因,并初步探索其在不同血细胞系中的表达.方法根据与鼠M96基因有较高同源性的人表达序列标签(EST)设计筛库引物,筛选成人睾丸及胎脑cDNA文库,采用BLAST及CLUSTAL W等程序比较分析筛选到的阳性克隆;应用多细胞系杂交膜分析该基因在各细胞系的表达;用氯化血红素诱导K562细胞向红系分化,探讨该基因在此过程中的表达变化.结果从文库中筛出长度分别为1 878和1 382 bp的M96 cDNA克隆,二者为剪接异构体,其开放阅读框分别编码491及262个氨基酸,分别命名为M961和M962(GenBank接受号分别为AF072814和AF073293).Northern杂交结果表明,在所检测的10种血细胞系中,人淋巴细胞白血病细胞系CEM的M961基因表达量高,在有巨核及红系特点的Hel、Dami及K562白血病细胞系中M961的表达量也较高.在K562细胞分化过程中,M961基因表达略有升高.结论M961基因在某些白血病细胞系中表达量较高.

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