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滤泡辅助性T细胞的研究进展
滤泡辅助性T细胞(Tfh)是近发现的辅助B细胞新的CD4+T细胞亚群.趋化因子受体5(C-X-C chemokine receptor type 5,CXCR5)、诱导性共刺激分子(inducible co-stimulator,ICOS)等主要功能分子参与了Tfh细胞的分化.Tfh细胞功能调节异常或Tfh细胞相关分子表达异常,可能与某些自身免疫性疾病、免疫缺陷病和恶性肿瘤的发病机制有关.本文就CXCR5和Tfh细胞的发现、Tfh细胞的起源与Tfh细胞功能相关的细胞因子,Tfh效应细胞和记忆细胞的迁移和定位、Tfh细胞异常与疾病等问题进行了综述.
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人ICOS-Linker-Ig真核表达载体构建及二级结构分析
目的构建人重组ICOS-Linker-Ig真核表达载体并预测其二级结构及Linker的合理性.方法扩增人ICOS胞外域及IgG Fc段,设计一段柔性Linker将二者连接.经测序分析得到融合基因序列.应用核酸和蛋白质序列分析软件EditSeqTM对融合基因及Linker部位翻译后二级结构水平的一些生物学特性,诸如柔性、抗原性、亲水性及表位等加以预测分析.结果 ICOS-Linker-Ig融合基因的氨基酸序列经软件分析,并分别与ICOS和IgG单独分析结果比较,发现在二级结构水平未出现新的抗原性,同时Linker部位具有很低的抗原性,亲水性无改变,Linker部位呈中性且柔性良好,不影响两端蛋白质二级结构和融合蛋白空间构象.ICOS和Ig具有各自原来的表位特征,无新表位出现.结论本研究构建的ICOS-Linker-Ig能够保留ICOS和Ig各自生物活性和功能,计算机分析表明翻译后不影响蛋白质空间结构的形成,适合融合蛋白功能的发挥.
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诱导性共刺激分子表达与原因不明复发性流产的相关性研究
目的 探讨诱导性共刺激分子(EOS)的表达与原因不明复发性流产(URSA)的关系.方法 采集10例诊断为难免流产的URSA患者(URSA组)和10例正常早孕妇女(正常对照组)的部分蜕膜组织和外周血,采用流式细胞术检测蜕膜组织和外周血CD3+和CD4+T细胞中ICOS的表达；Real-Time PCR检测蜕膜组织中ICOS mRNA的表达情况.结果 URSA组蜕膜组织中ICOS+ CD3+T淋巴细胞亚群所占百分比为(0.612±0.693)％,显著高于正常对照组的(0.056±0.103)％,差异有统计学意义(P＜0.001).URSA组外周血ICOS+ CD4+T淋巴细胞亚群所占百分比为(1.943±0.762)％,显著高于正常对照组的(0.221±0.127)％,差异有统计学意义(P＜0.001).URSA组蜕膜组织中ICOS mRNA的相对表达量较正常对照组显著升高[(9.875±1.464)vs(2.701±1.737)],差异有统计学意义(P＜0.05).结论 蜕膜组织中ICOS的表达异常与URSA的发病具有密切关系.
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特应性皮炎患者外周血滤泡性辅助性T细胞的特征
目的 探讨特应性皮炎(AD)患者外周血滤泡性辅助性 T(Tfh)细胞的表达特征,分析其在特应性皮炎发病机制中的作用.方法 选择该院20例AD患者(AD组),运用欧洲特应性皮炎评分系统(SCORAD)评估病情严重程度.采用中药汤剂口服和他克莫司软膏外用治疗,治疗时间1个月.使用流式细胞技术检测患者治疗前、治疗1个月后和12例健康对照者(健康对照组)外周血T fh细胞的频率及其表面程序性死亡受体1(PD-1)、诱导性共刺激分子(ICOS)的表达水平,并分析其与AD严重程度的相关性.结果 与健康对照组比较,AD组外周血Tfh细胞频率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05).Tfh细胞PD-1、ICOS 表达水平在AD组患者显著升高,差异有统计学意义(P<0.05).Tfh细胞频率与AD严重程度呈正相关关系(P<0.05), Tfh细胞PD-1、ICOS表达水平仅SCORAD评分升高而升高,但差异无统计学意义(P>0.05).经1个月治疗,患者皮疹好转、瘙痒减轻,外周血 Tfh 细胞频率及其表面 PD-1、ICOS 表达水平较治疗前明显降低(P<0.05).结论 Tfh细胞频率和功能在AD患者外周血均发生改变,该细胞可能在AD的免疫学发病机制中具有重要的临床作用.
