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体细胞基因敲除文献资料
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人大肠癌细胞系HCT116中Sirt1基因敲除细胞株的构建
目的 利用AAV介导的体细胞基因敲除技术,在人大肠癌细胞系HCT116中对靶基因Sirt 1进行敲除,达到基因沉默的目的.方法 构建Sirt1打靶载体,通过病毒包装、感染、药物筛选、PCR鉴定、Western blotting鉴定等步骤获得Sirt 1基因敲除的细胞株.结果 经过筛选和鉴定后获得两个Sirt1-/-阳性克隆,成功构建HCT116 Sirt1-/-细胞系.结论 通过体细胞敲除技术,我们成功地获得Sirt1敲除肠癌细胞株.
