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  • ID-LC-MS/MS评估糖尿病大鼠DNA和RNA氧化损伤

    作者:王晚霞;罗顺斌;夏梦明;胡国新;蔡剑平

    目的 评估高血糖对DNA和RNA氧化损伤的影响.方法 以链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠为模型,运用放射性核素稀释高效液相-串联质谱(ID-LC-MS/MS)法检测大鼠肾性、心性、肝性、肺、脑、睾丸、附睾、血浆和尿中的核酸氧化标志物8-氧化脱氧鸟苷(8-oxo-dGsn)和8-氧化鸟苷(8-oxo-Gsn)的含量,并进行比较分析.结果 虽然不同脏器DNA中8-oxo-dGsn/106 dGsn和RNA中8-oxo-Gsn/106Gsn的基础水平不一致,但是模型组SD大鼠不同脏器中8-oxo-Gsn/106Gsn和8-oxo-dGsn/106dGsn的水平均高于对照组,6月组糖尿病大鼠肾脏、肺脏和睾丸中8-oxo-dGsn/106dGsn的水平高于对照组相应脏器的水平(P<0.05);3月组糖尿病大鼠肾脏、心脏和睾丸中8-oxo-Gsn/106Gsn的水平高于对照组相应脏器的水平(P<0.05);除了脑和肺脏,6月组糖尿病大鼠各脏器中8-oxo-Gsn/106Gsn的水平均高于其对照组(P<0.05);糖尿病大鼠血浆8-oxo-dGsn和8-oxo-Gsn浓度明显高于其同龄对照大鼠,且随着高糖血症的持续而增加.尿液检测结果的趋势与血浆中的检测结果一致,RNA氧化代谢产物8-oxo-Gsn均高于DNA的氧化代谢产物8-oxo-dGsn.结论 高血糖引起的氧化应激增强可以造成多器官DNA和RNA氧化损伤增加,DNA和RNA氧化损伤随着高糖血症的持续而增加;RNA氧化损伤水平高于DNA氧化损伤,其标志物尿液8-oxo-Gsn可以作为评估糖尿病氧化应激状态的良好指标.

  • 幽门螺杆菌感染致胃黏膜及尿中RNA损伤水平测定

    作者:刘晓;刘亚巍;罗庆峰;张帆;刘倩;陈哲;蔡剑平

    目的 检测幽门螺杆菌(Hp)感染患者胃窦部黏膜及尿液中8-氧化脱氧鸟苷及8-氧化鸟苷水平,探讨Hp感染与DNA及RNA氧化损伤的相关性,并比较不同取材部位水平的差异.方法 Hp阳性组85例,Hp阴性组31例.分别留取尿液标本以层析分析法,同时两组中各30例取胃窦部黏膜以免疫组化法检测8-氧化脱氧鸟苷及8-氧化鸟苷.结果 胃窦部黏膜检测结果显示Hp阳性组8氧化鸟苷高于Hp阴性组,差异有统计学意义(P<0.05),8-氧化脱氧鸟苷高于Hp阴性组,差异无统计学意义(P>0.05);尿液检测,Hp阳性组8-氧化鸟苷及8-氧化脱氧鸟苷水平均高于Hp阴性组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 尿液检测与胃黏膜组织检测结果趋势一致,Hp感染后DNA及RNA氧化损伤水平高于Hp阴性对照组,且尿液检测更敏感.RNA氧化产物8-氧化鸟苷可能是Hp感染致病的一个较敏感的指标.

  • 8-氧化鸟苷对慢性肾脏病患者肾功能的评估价值

    作者:徐冷楠;赵班;王海涛;蔡剑平;毛永辉

    目的 探讨来源于DNA的氧化产物8氧化脱氧鸟苷(8-oxo-dGsn)和来源于RNA的8氧化鸟苷(8-oxo-Gsn)与慢性肾脏病(CKD)的关系.方法 2015年1月至2016年12月就诊于北京医院肾内科的146例CKD患者,年龄21~88(56.43±16.79)岁,其中男70例,占47.95%,CKD 1~5期分别为30、30、31、30、25例,收集空腹血及晨尿.应用同位素稀释高效液相-串联质谱(ID-LC-MS/MS)定量测定所有患者血浆和晨尿8-oxo-dGsn、8-oxo-Gsn水平.结果 CKD 1~5期患者尿8-oxo-Gsn/Cr分别为(3.07±1.07) μmol/mol、(3.42±1.34) μmol/mol、(3.72±1.47) μmol/mol、(3.90±1.93) μmol/mol、(3.75±2.26) μmol/mol,其中CKD 4期患者尿8-oxo-Gsn含量高于其他4期(均P<0.05);CKD 1~5期患者血/尿8-oxo-Gsn分别为0.02±0.02、0.03±0.02、0.06±0.04、0.10±0.05、0.34±0.03,CKD4~5期患者明显升高,以5期升高更明显(均P<0.05).8-oxo-Gsn与肾功能呈现较好的相关性:血8-oxo-Gsn与血肌酐相关系数r=0.629(P<0.001),尿/血8-oxo-Gsn与eGFR相关系数r =0.799(P <0.001),血/尿8-oxo-Gsn与血/尿肌酐相关系数r=0.888(P <0.001).随着年龄增长,CKD患者RNA氧化增加,≥60岁患者尿8-oxo-Gsn明显升高(P<0.05).多重线性回归分析结果显示,8-oxo-Gsn仅与血肌酐有相关性(β=0.656,t=8.275,P<0.001).结论 RNA氧化与肾脏疾病的发生发展密切相关,随着疾病进展,RNA氧化加重.血/尿8-oxo-Gsn的显著升高对终末期肾脏病有评价意义.

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