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利拉鲁肽通过脂肪甘油三酯水解酶通路改善肝细胞脂肪变性
目的 研究胰高血糖素样肽1(GLP-1)类似物利拉鲁肽是否通过脂肪甘油三酯水解酶(ATGL)通路改善肝细胞脂肪变性及其机制.方法 体外培养人类肝癌细胞系HepG2细胞随机分为:正常对照组(NC组)、脂肪变性肝细胞模型组(M组)、利拉鲁肽组(L组)、一磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)抑制剂(Compound C)+利拉鲁肽组(CC组).其中M组选择0.5 mmol/L游离脂肪酸(FFAs)24 h诱导细胞脂肪变性;L组选择100 nmol/L利拉鲁肽干预脂肪变性肝细胞模型24 h;CC组为添加10 mmol/L Compound C的脂肪变性肝细胞模型再以100 nmol/L利拉鲁肽干预.Western blotting法检测各组肝细胞中磷酸化AMPK(p-AMPK)、AMPK、磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及ATGL蛋白表达.组间数据比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验.结果 与NC组相比,M组细胞内p-AMPK/AMPK、ATGL水平下降,p-mTOR/mTOR水平升高(分别为0.208±0.069比0.444±0.106、0.112±0.038比0.333±0.052、0.421±0.105比0.126±0.041,t=3.620、5.900、5.060,均P<0.05);与M组相比,L组p-AMPK/AMPK及ATGL水平显著性升高,p-mTOR/mTOR水平显著性降低(分别为0.391±0.076比0.208±0.069、0.233±0.058比0.112±0.038、0.230±0.066比0.421±0.105,t=2.810、3.218、3.281,均P<0.05);CC组较L组肝细胞内p-AMPK/AMPK及ATGL水平显著性降低,p-mTOR/mTOR水平显著性升高(分别为0.234±0.061比0.391±0.076、0.144±0.030比0.233±0.058、0.366±0.058比0.230±0.066,t=2.414、2.360、2.334,均P<0.05).结论 利拉鲁肽可能通过激活AMPK-mTOR信号通路,增加肝细胞内ATGL蛋白表达水平,从而降低脂肪变性肝细胞内脂滴和TG含量,改善肝细胞脂肪变性.
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肿瘤坏死因子α诱导的胰岛素抵抗对小鼠脂肪甘油三酯水解酶的影响
目的 探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的胰岛素抵抗(IR)对糖脂代谢及脂肪甘油三酯水解酶(ATGL)的影响.方法 健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为2组,分别给予腹腔注射TNF-α6μg·kg-1·d-1(TNF组,20只)和等体积生理盐水(NC组,20只)共7 d.采用2-脱氧-3H葡萄糖(2-DOG)为示踪剂的扩展胰岛素钳夹技术评价小鼠胰岛素敏感性和糖代谢变化,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法分别测定代谢相关基因ATGL、激素敏感性脂酶(HSL)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)等组织mRNA或血浆蛋白表达水平的变化.结果 TNF-α处理后,小鼠空腹血糖(FBG)、血浆胰岛素和游离脂肪酸(FFA)水平均增高.在胰岛素钳夹术中,TNF组血浆胰岛素水平明显高于NC组[(341.7±17.7)vB(84.7±5.5)mU/L,P＜0.01],胰岛素对FFA的抑制作用明显障碍[FFA,TNF组:(0.82±0.03)mmol/L,NC组:(0.43±0.07)mmol/L,P＜0.01].TNF组葡萄糖输注率(GIR)明显低于NC组[(39.1±2.3)vs(54.2±2.2)mg·kg-1·min-1,P＜0.01],骨骼肌葡萄糖摄取率(MGU)也明显低于NC组[(15.8±1.7)vs(20.9±2.5)μmol·100 g-1·min-1,P＜0.01].TNF组脂肪组织ATGL mRNA表达明显低于对照组(0.85±0.09 vs 1.37±0.12,P＜0.01),ATGL蛋白水平也明显低于对照组(0.53±0.03 vs 0.65±0.05,P＜0.05).TNF组小鼠脂肪组织PPARγ/mRNA表达明显低于对照组(0.83±0.07 vs 1.07±0.07,P＜0.05).结论 在TNF-α诱导的IR中,ATGL在脂代谢相关通路中起着调控作用.
