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口蹄疫重组活载体疫苗vUTAL3CP1文献资料
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口蹄疫重组鸡痘病毒活载体疫苗vUTAL3CP1的构建与理化学特性研究
目的 构建含有口蹄疫病毒(FMDV)衣壳蛋白前体P1-2A和蛋白酶3C基因的重组鸡痘病毒活载体疫苗并研究其理化学特性. 方法 选用鸡痘病毒作为载体,将FMDV的衣壳蛋白前体P1-2A和蛋白酶3C基因插入到鸡痘病毒表达载体中,构建重组鸡痘病毒转移载体质粒Putal3cp1,并与鸡痘病毒282E4株共转染鸡胚成纤维细胞,通过药物BrdU加压筛选、间接免疫荧光实验以及Western blot等方法筛选并获得了一株重组鸡痘病毒.将其经酸、碱、加热、氯仿、乙醚以及胰蛋白酶处理,接种到CEF上观察处理前后口蹄疫重组活载体疫苗Vutal3cp1细胞病变,分析这些理化因子对口蹄疫重组鸡痘病毒活载体疫苗Vutal3cp1重组鸡痘病毒的影响. 结果 在Ph3.0～9.0范围内,Ph值变化不会造成该口蹄疫重组活载体疫苗Vutal3cp1毒价的显著变化;口蹄疫重组活载体疫苗VUTAL3CP1经50 ℃ 60 min、55 ℃ 30 min或60 ℃ 15 min即可被灭活;对氯仿敏感;经胰蛋白酶37 ℃作用1 h,毒价降低2.44 log10TCID50;对乙醚有抵抗力,经乙醚作用24 h病毒滴度下降1.0 log10TCID50. 结论 筛选并鉴定了含有口蹄疫病毒衣壳蛋白前体P1-2A和蛋白酶3C基因的重组鸡痘病毒活载体疫苗Vutal3cp1,为疫苗研制奠定基础.
关键词： 口蹄疫重组活载体疫苗vUTAL3CP1 构建 理化学特性
