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PCR-DHPLC法检测硅藻SSU基因在溺死鉴定中的应用
目的 采用PCR-DHPLC法检测硅藻SSU基因,评估其在溺死鉴定中的应用价值.方法 60只实验兔随机分为生前溺死(水中溺毙)、死后入水(空气栓塞致死后入水)、对照组(空气栓塞致死后不做处理);溺死人体脏器组织;取各组织检材提取硅藻DNA,PCR扩增硅藻特异的核糖体小亚基(SSU)片段,用琼脂糖凝胶电泳检测、DHPLC检测分析.结果 6份硝酸消化法检测阴性的溺死人体器官组织检材经PCR及琼脂糖凝胶电泳检出5例阳性.生前溺死组肺、肝、肾硅藻检出率分别为100％、90％、85％,死后入水组仅肺检出硅藻(15％),对照组各组织均为阴性;生前溺死组检出率明显高于死后入水组(P＜0.05).10份溺死人体器官组织检材采用DHPLC法检出硅藻种类明显多于微波消解-扫描电镜法(P＜0.05).脏器检出硅藻种类与溺死点水样一致.结论 采用PCR-DHPLC法检测硅藻SSU基因,有助于溺死鉴定和溺死地点的推断,具有法医学应用价值.
