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  • 全长细粒棘球蚴95抗原基因的克隆及DNA疫苗的构建

    作者:林仁勇;丁剑冰;温浩;王笑峰;魏晓丽

    目的:克隆分析新疆地区细粒棘球蚴95(Eg95)抗原全长基因的结构特点,并构建Eg95 DNA疫苗。方法:根据细粒棘球蚴95抗原基因序列设计PCR引物,应用PCR方法从新疆株细粒棘球蚴cDNA文库中克隆获得Eg95全长抗原目的基因。利用定向克隆技术将全长Eg95抗原基因片段克隆至真核表达质粒pcDNA3上,构建DNA疫苗pcDNA3-Eg95,测序确定基因碱基序列。利用DNAman软件及GeneBank/Blast功能,对其进行基因全序列分析及同源性比较。结果:从新疆株细粒棘球蚴cDNA文库中克隆出全长Eg95抗原基因。所克隆的全长Eg95抗原基因长度为471 bp,编码156个氨基酸。pcDNA3-Eg95阳性克隆均为正确连接全长Eg95抗原基因的重组质粒,可作为DNA疫苗作进一步的研究。新疆株全长Eg95抗原基因与GeneBank中已登录的新西兰株Eg95抗原基因序列一致。结论:成功克隆并构建了新疆株全长细粒棘球蚴95抗原基因DNA疫苗。

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