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细粒棘球绦虫EgG1Y162-1/2重组蛋白诱导小鼠免疫应答特点的比较
目的 研究和对比经生物信息学分析后重组构建的EgG1Y162-1/2蛋白诱导小鼠产生免疫应答反应的特点.方法 随机将60只小鼠分5组,根据所注射抗原的不同分为EgG1Y162-1组、EgG1Y162-2组、GST对照组、佐剂组和正常对照组.每2周免疫1次,共免疫4次.采集免疫前后的小鼠血清进行Elisa检测抗体效价;流式细胞术检测不同时间点淋巴细胞亚群(CD4+T细胞和CD8+T细胞)的动态变化;免疫10周后用细粒棘球蚴感染攻击小鼠,对比小鼠脾淋巴细胞体外刺激后的增殖反应、脾细胞凋亡率和小鼠囊重抑制率的检测结果.结果免疫后第10周,EgG1Y162-2组抗体滴度为1:20480高于EgG1Y162-1组抗体滴度1:5120.经原头蚴感染攻击的EgG1Y162-2组的淋巴细胞亚群(CD4+T细胞、CD8+T细胞)百分比均高于EgG1Y162-1组,且差异有统计学意义(P<0.05),但CD4+T/CD8+T细胞比值差异无统计学意义(P>0.05).免疫后的EgG1Y162-2组小鼠脾淋巴细胞在体外被特异性刺激后增殖水平高于EgG1Y162-1组,差异有统计学意义(P<0.05).检测显示EgG1Y162-2组的脾细胞凋亡率低于EgG1Y162-1,差异有统计学意义(P<0.05).疫苗保护实验中发现EgG1Y162-1组的小鼠囊重抑制率比EgG1Y162-2组低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 EgG1Y162-2抗原比EgG1Y162-1抗原具有更强的免疫优势作用,本研究不仅证明了生物信息学分析表位的准确性,也提示该表位信息丰富的抗原值得作为疫苗的保护性抗原进行深入研究.
关键词: 细粒棘球绦虫 EgG1Y162-1/2 免疫应答