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  • 针对HO-2基因的四种RNA干扰序列构建和效应观察

    作者:王珍珍;张腾业;陈仁金;袁红花;胡安康;吴连连;朱裕华;朱孝荣

    目的:构建和筛选出血红素氧合酶-2(HO-2)基因的RNA干扰载体,并观察其在小鼠脑血管内皮细胞中的表达情况.方法:根据小鼠HO-2基因的cDNA序列设计了4个HO-2基因干扰序列,克隆到干扰载体pG-PU6-GFP-Neo上,利用电穿孔法将干扰载体对小鼠脑血管内皮细胞进行转染.Real-time PCR和Western Blot检测小鼠脑血管内皮细胞中HO-2的表达.结果:干扰载体显著抑制小鼠脑血管内皮细胞中HO-2的表达,其中干扰载体pGPU6-GFP-Neo-HO-2-mus-768对HO-2mRNA的表达抑制达显著水平(P<0.01),蛋白的表达抑制达显著水平(P<0.05).结论:成功构建并筛选了HO-2表达干扰载体,为下一步的HO-2基因的功能鉴定奠定了基础.

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