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HBsAg腺病毒载体文献资料
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制备源自HBsAg基因修饰树突状细胞的外切体
目的:制备一种新型负载HBsAg基因的外切体(exosome)瘤苗,并探讨其生物学特性、免疫学功能.方法:运用分子克隆和病毒载体转染HBsAg基因构建AdVHBsAg-DC肝癌瘤苗,采用流式细胞术鉴定转染基因表达；提取exosome；以透射电镜观察、Western blot法鉴定exosome.结果:构建的重组AdVHBsAg腺病毒载体,经PCR和酶切鉴定,结果显示HBsAg基因片段已正确插入腺病毒载体中.包装的腺病毒载体具有良好的感染性,可以在293细胞中形成病毒颗粒.提取的exosome在透射电镜下可观察到直径为50-100nm的膜性微囊,圆形或椭圆形,有完整包膜.Western blot检测结果表明,exosome含有DC的特征分子和HBsAg基因.结论:成功制备并获得HBsAg基因修饰树突状细胞为来源的exosome瘤苗,为治疗乙肝相关肝癌提供新的思路.
关键词： 树突状细胞 HBsAg腺病毒载体 免疫治疗 Exosome
