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Notch信号通道文献资料
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Notch1胞内段荧光表达质粒的构建及鉴定
目的:构建能够在鼻咽癌细胞株中高效表达人Notch1信号胞内段(NIC)的荧光质粒.方法:通过RT-PCR获得人NIC的cDNA;利用基因重组技术插入到pEGFP-N1中;在脂质体介导下转染人低分化鼻咽癌细胞CNE2后,经荧光显微镜、RT-PCR和Western blot检测NIC的表达情况.结果:RT-PCR方法得到一条2424bp的特异性扩增产物,酶切和基因测序结果表明重组质粒构建成功.转染48h后,检测到绿色荧光表达,RT-PCR和Western blot的结果显示NIC的表达量升高.结论:正确构建了人NIC荧光表达质粒.该质粒能够在鼻咽癌细胞株中高效表达,为研究Notch信号通路在鼻咽癌中的作用奠定了实验基础.
