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SLC7A11基因文献资料
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SLC7A11基因表达沉默的肝癌细胞株的构建及筛选
目的:构建并筛选出SLC7A11基因表达沉默的肝癌LM3细胞株,为研究SLC7A11基因的表达沉默对肝癌发生发展的影响奠定基础.方法:针对SLC7A11基因的不同部位合成3个siRNA的寡核苷酸片段,分别将其克隆到真核表达载体pGPU6/GFP/Neo中.利用脂质体转染法分别将质粒导入肝癌LM3细胞,24小时后观察细胞内GFP表达情况,并通过real-time PCR及Western blot的方法比较各组细胞SLC7 A11基因mRNA和蛋白的表达水平,然后用G418对转染细胞进行筛选培养.结果:经酶切分析及测序验证,成功构建了靶向沉默SLC7A11基因的真核表达质粒pGPU6-SLC7A11-siRNA;通过real-time PCR及Western blot的方法验证,成功筛选出SLC7A 11基因表达沉默的肝癌LM3细胞株.结论:成功构建并筛选出SLC7A11基因表达沉默的肝癌细胞株,为进一步研究SLC7A 11基因表达沉默对肝癌细胞发生发展的影响奠定了基础.
