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sh-A tg7文献资料
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诱导／封闭自噬相关基因7对肾癌786-0细胞自噬的调控作用研究
目的：探讨诱导／封闭A tg7对肾癌786-0细胞自噬的调控作用。方法构建上调A tg7的慢病毒载体plenti6．3-A tg7，下调Atg7的慢病毒载体sh-Atg-1 lv、sh-Atg-2 lv ，空载对照慢病毒载体sh-scramb-con lv、plenti6．3-GFP ，分别转染肾癌786-0细胞系，未转染的786-0细胞系为空白对照。RT-PCR和Western blot检测各组Atg7的表达，研究plenti6．3-Atg7激活Atg7效率和sh-Atg-1 lv、sh-Atg-2 lv抑制Atg7效率。Western blot检测上述各组细胞LCII／LC3I蛋白比值，研究上调及下调 Atg7对肾癌786-0细胞自噬的激活及抑制作用。结果经过筛选，成功构建稳定上调Atg7的786-0／plenti6．3-Atg7xbx细胞系、稳定下调Atg7的786-0／sh-Atg-2 lv细胞系、空载对照786-0／sh-scramb-con lv、786-0／plenti6．3-GFP细胞系。与空白对照组比较，Atg7上调组786-0细胞LCII／LC3I比值显著升高（3．31±0．12 vs ．2．23±0．10 P＜0．01），具有稳定的自噬激活作用；Atg7下调组的786-0细胞LCII／LC3I比值显著降低（1．45 ± 0．11 vs ．2．23±0．10 P＜0．01），具有稳定自噬抑制作用。结论上调Atg7对肾癌786-0细胞系具有自噬激活作用，下调A tg7对肾癌786-0细胞系具有自噬抑制作用。
