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重链恒定区置换文献资料
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抗CEA抗体C2-45重链恒定区的置换与活性鉴定
目的:将抗癌胚抗原(CEA)单克隆抗体(mAb0C2-45(IgG4)转变成IgG1,增强其在抗肿瘤免疫中的作用.方法:采用PCR从C2-45（IgG4）基因中克隆VH和Vk基因,并插入到含有人IgG1恒定区（CH）基因的杆状病毒表达载体pAc-k-CH3中.用构建的重组基因感染Sf9昆虫细胞,将获得的高滴度重组病毒用于终表达重组蛋白.应用免疫亲和层析法,纯化培养上清中表达的重组蛋白C2-45（IgG1）,并鉴定其与CEA结合的能力和CH的生物学功能CDC及ADCC.结果:经CH置换形成的重组蛋白C2-45（IgG1）,既保留了对于表达CEA的肿瘤细胞的结合,又比原抗体C2-45（IgG4）的补体依赖的细胞毒作用（CDC）和抗体依赖的淋巴细胞的细胞毒作用（ADCC）强得多.结论:成功地应用基因工程的方法制备了置换CH的抗CEA的人抗体C2-45（IgG1）,使其在肿瘤的免疫治疗中具有更广泛的应用价值.
