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脂肪储存小滴蛋白5文献资料
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脂肪储存小滴蛋白5基因的克隆与原核表达
目的:克隆脂肪储存小滴蛋白5(LSDP5)基因,并在大肠杆菌中表达.方法:利用PCR技术从小鼠肝脏cDNA中扩增LSDP5基因,并将其克隆到pMD18-T载体中,进行测序.同时,通过疏水性和二级结构分析,将LSDP5的片段克隆到原核表达载体pEGX-4T-1,构建GST融合表达质粒pEGX-LSDP5,在大肠杆菌BL21中进行表达.结果:成功地克隆了LSDP5基因,DNA测序证实,与GenBank公布的序列一致.含LSDP5片段的pGEX-LSDP5基因表达质粒在大肠杆菌经IPTG诱导后,能够表达相对分子质量(Mr)40 000的融合蛋白.结论:获得了LSDP5全长基因,成功构建了原核表达质粒pEGX-LSDP5,并在大肠杆菌中得到表达,为其相关研究奠定了一定的基础.
