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兔牙周膜细胞文献资料
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诱导型一氧化氮合酶基因转染兔牙周膜细胞的瞬时表达检测
目的 检测含有人诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因的重组质粒pEGFP-iNOS体外转染兔牙周膜细胞后的瞬时表达情况,为动物牙周局部导入外源性iNOS基因奠定实验基础.方法 通过脂质体介导将重组真核质粒pEGFP-iNOS转染兔牙周膜细胞,在荧光显微镜下观察瞬时转染情况.并在转染后12 h与48 h,应用实时定量PCR检测iNOS基因的转录,Western免疫印迹技术检测iNOS蛋白表达.设空质粒转染组和空白组为对照.结果 重组质粒转染后12 h即可观察到荧光蛋白的表达,pEGFP-iNOS转染组细胞中有iNOS mRNA转录及iNOS蛋白的表达.结论 iNOS基因成功导入兔牙周膜细胞,瞬时转染后可在基因和蛋白水平检测到外源性基因的表达.在兔牙周组织导入iNOS基因从而诱导NO生成是具有可行性的.
