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单核细胞条件性培养液文献资料
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成人外周血来源树突状细胞体外诱导培养及成熟调控
人体内树突状细胞具有成熟和未成熟两种形态.前者是早期免疫应答的强有力的抗原递呈细胞.后者具有截然不同的生物学特性,且能诱导免疫耐受.本研究从成人外周血中分离前体细胞,利用单核细胞条件性培养液,培养出比较均一的未成熟及成熟阶段的树突状细胞.第一阶段:从外周血分离出能粘附塑料的单核细胞,在GM-CSF+IL-4存在条件下培养6~7 d;第二阶段,加入单核细胞条件性培养液促进树突状细胞分化成熟.仅经第一阶段培养的细胞主要为未成熟树突状细胞,仍然表达单核细胞的表面标志CD14,具有活跃的内化活动,其MHC-II分子主要分布在胞内的MIIC器室;经第二阶段培养的树突状细胞则具有成熟树突状细胞的全部特征:典型的树突状形态,悬浮生长,MHC-II分子主要分布在胞膜表面,表达树突状细胞的特异性标志CD83,刺激同种T淋巴细胞增殖的能力强,并在脱离特定细胞因子环境3 d后仍能保持该性状不变.由于该途径培养成熟、未成熟树突状细胞完全受外部因素调控,可能是获得均一的成熟和未成熟树突状细胞供科研和临床应用的较好途径.
关键词: 树突状细胞 单核细胞条件性培养液 成熟调控