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人脑髓鞘碱性蛋白(MBP) 表达载体 大肠杆菌文献资料
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重组人脑髓鞘碱性蛋白及其抗体的研究
将EcoR1和Sal I酶切的人脑髓鞘碱性蛋白(MBP)基因cDNA克隆片段与表达载体pGEX-5T重组后转化大肠杆菌,经筛选,增殖和IPTG诱导,阳性克隆SDS-PAGE结果证实表达一条特异42 KDa区带,Western印记杂交证实该区带具MBP抗原特异性,免疫斑点杂交和ELISA检测表达产量占菌体可溶性蛋白含量6%,达414.6 mg/L菌液.将含可溶性MBP蛋白的菌液行SDS-PAGE分离纯化得重组MBP抗原,对新西兰兔进行背部皮下多点注射,5次免疫后以琼脂板免疫双扩法检测抗体效价达1∶16,并通过免疫斑点杂交和Western印迹杂交证实该抗体具抗MBP特异性.
