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丙型肝炎病毒 非结构蛋白NS5A RNA依赖性RNA聚合酶文献资料
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丙肝病毒NS5A蛋白对NS5B的RdRP活性影响的研究
丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV) 非结构蛋白( Nonstructural,NS)5A在HCV 基因组复制中的作用目前尚不清楚.本文研究 His-NS5A对 NS5B的RNA依赖性RNA酶(RdRP)活性的影响,以了解NS5A在HCV RNA复制中的作用.采用变性-复性方法,纯化大肠杆菌表达的重组组氨酸NS5A融合蛋白.GST 结合洗脱实验(GST pull-down assay) 研究NS5A 和 NS5B是否结合.以不同的摩尔浓度比,将纯化的 NS5B 和 NS5A 蛋白混合,检测NS5A 对NS5B的RdRP活性的影响.获得高得率的纯化His-NS5A蛋白.重组NS5A 蛋白可在体外与NS5B结合并抑制后者的RdRP活性.本研究报道了纯化重组His-NS5A 蛋白的变性-复性方法,结果显示纯化的重组NS5A 在体外可与NS5B 相互结合,并明显抑制NS5B RdRP 活性.提示了HCV NS5A 在病毒复制中的可能作用.
