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Enolase 1文献资料
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ENO1多克隆抗体的制备与初步鉴定
目的 制备抗Enolase 1的兔多克隆抗体(pAb)并进行特异性鉴定.方法 以人宫颈癌细胞系HeLa细胞eDNA为模板,构建重组表达质粒pET-32a-ENO1.His-ENO1融合蛋白在大肠杆菌中高效表达,纯化后作为免疫原制备兔多克隆抗体.采用ELISA、Western blot和免疫组化法鉴定抗ENO1兔多克隆抗体针对重组蛋白和天然蛋白的特异性.结果 His-ENO1融合蛋白在相对分子质量约29 000处呈现明显表达条带.Western blot鉴定表明,制备的抗ENO1兔多克隆抗体可特异性地识别ENO1重组蛋白和不同肿瘤细胞系HeLa、MCF7、HepG2和K562中的ENO1蛋白.免疫组化结果表明该多抗可特异性识别肾组织中的ENO1蛋白.结论 成功制备出兔抗人ENO1抗血清,为进一步研究ENO1的功能奠定了基础.
