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  • 两步法从CD34+造血干细胞诱导树突状细胞

    作者:徐莉;康自珍;王斌;蔡海波;谭文松

    目的研究如何从有限的造血干细胞获得大量的树突状细胞(DC),为进一步研究树突状细胞的生化特性及临床应用提供技术支持.方法利用免疫磁珠法(MACS)富集CD34+细胞,先在培养体系中加入FLT3配体(FL)、血小板生成素(TPO)及干细胞因子(SCF)等细胞因子,然后对富集的细胞进行扩增,扩增后的细胞在GM-CSF和IL-4的作用下诱导7 d,诱导后的细胞用流式细胞仪分析树突状细胞特征性表面标记CD1a.结果两步法能够获得大量的DC,在第一步中用TPO/FL/SCF/IL-3/IL-6来扩增CD34+细胞能获得多的DC.在相同的培养时间下(3周),两步法能扩增出274倍的DC,大大的超过了直接诱导的扩增倍数(24倍).并且,随着培养时间的增长,DC的扩增倍数不断上升.结论两步法能从少量的脐血CD34+前体细胞诱导扩增出大量的DC,为从病人动员的CD34+细胞诱导扩增DC用于临床提供了实验依据.

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