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  • 重组人胸腺法新的制备及其作为老年人流感疫苗免疫增强剂的效果评价

    作者:马杉姗;徐宏伟;段子鹏;李凡

    目的 采用重组技术制备重组人胸腺法新(rhTα1),初步探讨rhTα1对老年小鼠接种流感疫苗免疫应答效果的影响.方法 用DNA重组技术构建胸腺法新的原核表达载体pGE-Tα1,将重组质粒转化至大肠杆菌BL21中,经高密度发酵和纯化成功制备rhTα1.老年Balb/c小鼠接种流感疫苗后,随机分为实验组和对照组,实验组给予低、中、高剂量(0.2、0.4、0.8 mg/kg)的rhTa1,对照组给予PBS(阴性对照组)和化学合成的胸腺法新(cTα1 0.4 mg/kg,阳性对照组),皆皮下注射,每周2次,连续4周.动态监测小鼠血清中的血凝抑制(HI)抗体效价,采用MTT法测定小鼠脾脏T、B淋巴细胞转化功能、使用ELISA方法检测血清细胞因子水平(IL-12,IFN-y),并观察脾脏形态学结构的变化.结果 rhTα1的表达载体构建成功,经发酵和纯化获得纯度>95%的目的蛋白;动物实验显示,与阴性对照组比较,rhTα1各浓度组与cTα1组均能提高老年鼠的HI抗体效价,提高脾脏T、B淋巴细胞转化功能以及血清中IL-12、IFN-γ的表达水平,脾脏组织病理形态明显改善,而且rhTα1中高剂量组与cTα1组效果相近(P>0.05).结论 使用DNA重组技术成功制备rhTα1,且rhTα1能够提高老年小鼠流感疫苗接种的免疫效果,为开发适合老年人的疫苗免疫应答增强剂提供了理论基础.

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