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α4亚基RT-PCR文献资料
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人整合素分子α4亚基片段的克隆及大肠杆菌的表达
目的克隆并原核表达α4亚基片段.方法从IL-60细胞系中提取总RNA,以RT-PCR方法分两段扩增人整合素分子α4亚基片段2.0kbcDNA,将两片段连接,并将其中的1.7kb基因片段亚克隆至表达载体PGEX-KG中,IPTG诱导表达.结果RT-PCR扩增并克隆了α4的两段cDNA,序列分析表明:与文献报道的α4 cDNA序列基本一致.两片段成功连接后,将其中的1.7kb亚克隆至表达载体PGEX-KG中,经诱导在大肠杆菌中得到高效表达.结论获得了α4亚基2.0kbcDNA片段,及其中1.7kb的原核表达产物对于研究α4整合素的功能有重要意义.
关键词: 整合素 α4亚基RT-PCR cDNA克隆