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细胞内培养文献资料
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细胞内快速连续传代培养甲肝病毒的研究
目的:研究甲肝病毒在细胞内快速连续传代培养病毒增殖情况,探索疫苗生产工艺改进的可能性.方法:将甲肝病毒吕8株感染KMB17细胞后形成带毒细胞,每7 d传代1次,检测每次收获物的甲肝病毒抗原(HAAg)滴度及感染性滴度,比较滴度的变化,同时检测一步生长曲线,分析病毒增殖特性有无变化.结果:甲肝病毒吕8株感染KMB17细胞后每7 d传代1次,其第1～8代抗原滴度为1024～2048 Eu/0.1ml,感染性滴度为7.33～7.67 lg CCID50/ml,第9代开始下降,抗原滴度仅为256 Eu/0.1ml,感染性滴度为6.83～7.00lg CCID50/ml;在连续传10代内,细胞均未出现CPE现象;第10代与第1代相比,其一步生长曲线病毒增殖高峰均为20～25 d,没有明显变化.结论:甲肝病毒吕8株在KMB17细胞上每7 d传代1次,在第8代以内,其抗原滴度及感染性滴度均能达到较高的程度.经细胞内连续快速传代后,HAV吕8株生长的增殖高峰约为第20～25 d,与传代前样品没有明显差别.
