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造血定型文献资料
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c-myb对胚胎干细胞体外造血分化及定型的影响
目的通过体外胚胎干细胞培养体系对ES细胞进行c-myb等位基因打靶,建立c-myb+/+及c-myb-/- ES细胞模型的基础上,探讨转录因子c-myb在造血定型和分化中的作用.方法通过体外ES细胞去除LIF半固体介质EBs的造血分化体系,采用甲基纤维素克隆形成分析和real-time PCR观察c-myb+/+及c-myb-/- ES细胞,比较分析其不同分化过程及阶段中造血各系形成和相关基因表达变化.结果 c-myb+/+及c-myb-/- ES胚胎体(EBs)大小及形态相似,c-myb+/+ES EBs形成显著多于c-myb-/-.c-myb+/+组CFU-E出现在第6天,高峰为第8天;c-myb-/-组也有相似的改变,但其CFU-E数目少于c-myb+/+.c-myb+/+组CFU-M高峰为第7天;c-myb-/-也有相似的改变,但其CFU-M数目高于c-myb+/+.c-myb+/+CFU-GM出现在第7天,高峰为第12天,而c-myb-/-未见CFU-GM形成.real-time PCR分析显示,c-myb-/-及c-myb+/+ β-globin, zeta-globin, Lys, C-fms基因表达无显著变化.结论低水平的c-myb不影响祖细胞的扩增,但影响其终末分化.低水平的c-myb表达在造血定型中对红系的发育具有一定的影响,而对巨噬细胞的发育成熟无明显影响.c-myb的表达水平对造血分化相关基因的表达没有明显的影响.
