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  • 运用荧光分光光度仪观测结核杆菌耐链霉素耐药rpsL 43密码子发夹探针液相杂交信号

    作者:陈庆海;华兴;张波;张雪;黄君富;匡红;府伟灵

    目的 设计针对结核杆菌耐链霉素(SM)rpsL 43密码子的发夹型DNA探针,尝试运用荧光分光光度仪直接观测液相中发夹探针与rpsL 43密码子扩增产物杂交后荧光信号,从而检出该位点突变.方法 运用软件Beacon designer 设计针对rpsL 43密码子的发夹探针,应用荧光分光光度仪检测rpsL 43密码子扩增片段与探针杂交后荧光信号,并比较扩增产物测序结果.结果 通过荧光分光光度仪观测到结核杆菌标准株及SM耐药rpsL 43密码子扩增产物杂交荧光信号存在显著差异;20株SM耐药组与10株H37RV标准株对照组荧光信号强度比较,SM耐药组rpsL 43密码子突变检出率为70%,测序法突变检出率为65%,发夹探针杂交法假阳性株1例(504S).结论 应用荧光分光光度仪直接观测发夹探针液相杂交荧光信号具有简单、灵敏等优特点;rpsL 43密码子点突变是重庆地区SM耐药的主要因素之一.

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