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电针对轴突生长导向因子-1和臂板蛋白3a在局灶性脑梗死大鼠脑皮质表达的影响
目的 观察局灶性脑梗死大鼠皮质轴突生长导向因子-1(netrin-1,Ntn1)和臂板蛋白3a(semaphorin-3a,sema3a)的表达及电针干预对其表达的影响.探索Ntn1与sema3a在电针对脑梗后神经可塑性影响中的作用.方法 将130只雄性SD大鼠分为正常组(n=10)、模型组(n=60)及电针组(n=60).利用线栓法制作大脑中动脉闭塞模型.分别在术后1、3、7、14 d时,对术后大鼠进行神经功能评分(modified neurologic severity scores,mNSS),利用免疫组化检测缺血侧大脑脑皮质中Ntnl、sema3a、神经丝蛋白200(NF200)分布和表达,免疫印迹法检测缺血侧大脑皮质Ntnl和sema3a的蛋白表达.结果 免疫组化结果显示在各个时相点大鼠脑皮质均表达Ntn1和sema3a,主要集中在细胞质阳性表达.Westernblot检测结果显示,与正常组相比,模型组Ntn1蛋白的表达水平在脑梗死后1d即开始明显上升(P＜0.01),3d时呈上升趋势(P＜0.01),7d时达峰值(P＜0.01),14 d时仍显著高于基础水平(P＜0.01),电针组与模型组相比,Ntn1蛋白表达趋势相同,但表达量明显高于模型组,术后1、3、7、14 d时有统计学差异(P＜0.05,P＜0.01).与正常组相比,模型组sema3a蛋白的表达水平在术后1d即开始上升(P＜0.01),7d时达高峰(P＜0.01),14 d时仍高于基础水平(P＜0.01).同时相点电针组与模型组相比sema3a均呈现低表达,1、3d和7、14 d时有统计学差异(P＜0.05,P＜0.01),峰值同样在7d时出现.Western blot检测结果与免疫组化分析结果基本相符.7、14 d时电针组与模型组相比mNSS评分存在统计学差异(P＜0.05),14 d时电针组与模型组相比NF200的表达量存在统计学差异(P＜0.05).结论 局灶性脑梗死后大鼠皮质Ntn1与sema3a表达明显上调,给予电针干预后可提高Ntn1的表达并抑制sema3a的表达,促进轴突的再生与修复,这可能是电针促进脑梗死后神经功能恢复的机制之一.
关键词： 脑缺血再灌注 电针 轴突生长导向因子-1 臂板蛋白3A
