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钙库调控的钙离子通道对大鼠膀胱平滑肌收缩性调控的研究
目的 分析胞内钙库调控的钙离子通道(store operated calcium channels,SOCCs)在大鼠膀胱平滑肌中的功能.方法 RT-PCR检测SOCCs相关蛋白基因表达;使用SOCCs的激动剂CPA(10 μ,mol/L)以及抑制剂SKF-96365(10 μmol/L),采用离体肌条的方法观察其肌肉的收缩,全细胞膜片钳技术观察膀胱平滑肌细胞电流,激光共聚焦显微镜观察其膀胱平滑肌细胞内钙离子变化.结果 RT-PCR检测到TRPC3、TRPC4和STIM1基因表达.加入CPA激活SOCCs后,离体肌条实验结果显示膀胱平滑肌离体肌条收缩频率为(5.937 5±1.108 0)/min,比加入CPA前明显增加(P<0.05),收缩幅度为(0.067 1 ±0.027 0)g,比加入CPA前明显降低(P<0.05);膜片钳实验结果显示钙电流较加入CPA前显著增加,-80 mV电流密度为(-3.127 1 ±0.9087)pA/pF,20 mV电流密度为(1.048 1 ±0.322 5)pA/pF(P <0.05);激光共聚焦显微镜实验结果显示钙离子相对荧光(1.150 7±0.212 1)较加入CPA前显著增加(P<0.05).加入抑制剂SKF-96365抑制SOCCs后,离体肌条收缩频率为(5.081 3±1.129 5)/min,较加入CPA后显著减缓(P<0.05),收缩幅度为(0.079 0±0.033 0)g,较加入CPA后显著增加(P<0.05);膜片钳显示钙电流较加入CPA后显著减少,-80 mV电流密度为(-2.678 1±0.8044)pA/pF,20 mV电流密度为(0.907 7 ±0.346 2)pA/pF(P <0.05);激光共聚焦显微镜实验结果显示细胞内钙离子相对荧光(1.028 9±0.204 7)较加入CPA后显著减少(P<0.05).结论 膀胱平滑肌中可以表达SOCCs相关的通道,膀胱平滑肌的收缩性受到SOCCs的影响.
关键词: 钙库调控的钙离子通道 膀胱平滑肌 钙离子