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简单重复序列区间聚合酶链反应体系文献资料
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当归简单重复序列区间-聚合酶链反应体系的建立及优化与品种(系)间遗传关系研究
目的:建立并优化当归简单重复序列区间(ISSR)-聚合酶链反应(PCR)体系并对6个当归品种(系)的遗传关系进行研究.方法:以ISSR-PCR扩增结果为指标,Mg2+浓度、TaqDNA聚合酶活性、dNTPs浓度、引物浓度、DNA模板用量为5因素,通过正交、单因素试验优化ISSR-PCR体系.应用优化体系对6个不同品种(系)的当归样本进行遗传关系分析.结果:当归ISSR-PCR佳反应体系为在20 μl反应体系中含Mg2+(10×PCR Buffer) 1.5 mmol/L、TaqDNA聚合酶0.6 U、dNTPs 0.375 mmol/L、引物0.3μmol/L、DNA模板42 ng.6个当归品种(系)的多态性位点百分率为13.04％,Nei's基因多样性指数为0.058 0,Shannon多样性指数为0.082 7.结论:建立的当归ISSR-PCR体系可用于当归分子遗传学研究,6个当归品种(系)间遗传差异较小.
关键词： 当归 简单重复序列区间聚合酶链反应体系 建立 遗传关系
