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双向电泳(2D)文献资料
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短穗鱼尾葵花粉总蛋白的双向电泳及分析
目的 对短穗鱼尾葵花粉过敏原蛋白质组分进行双向电泳及其结果分析,构建短穗鱼尾葵花粉蛋白双向电泳图谱,明确短穗鱼尾葵花粉的过敏原蛋白组分的分布和构建蛋白质组学数据库.方法 提取短穗鱼尾葵花粉的总蛋白,取上清液进行Bradford法定量总蛋白浓度,采用13 cm IPG胶条(pH 3～10)和12％的SDS-PAGE凝胶作为二项分离胶进行双向电泳(2D)分离,银染法分析其总蛋白组成,利用ImageMaster2D软件对2D胶进行检测和图像分析.结果 双向电泳图谱共检测到516个短穗鱼尾葵花粉蛋白点,其蛋白相对分子质量在12～174 kD,主要在10～50 kD;等电点在pH 3～10,主要分布在pH 5～8.含量多的蛋白质其相对分子质量和等电点分别为13 kD和pH 6.258 37.含量低的蛋白质其相对分子质量和等电点分别为29 kD和pH 3.615 79.结论 成功构建较为完整的短穗鱼尾葵花粉蛋白双向电泳图谱,为建立短穗鱼尾葵花粉蛋白质组学数据库及其过敏的诊断和治疗提供了依据.
