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LL-37-haFGF文献资料
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正交设计优化大肠杆菌表达LL-37-haFGF的摇瓶发酵条件
目的 在摇瓶发酵条件下,研究重组大肠杆菌诱导表达融合蛋白LL-37-haFGF的表达规律.方法 以目的蛋白的相对表达量为评价指标,通过单因素分析和正交设计,从pH值、诱导时机、诱导时间、诱导剂浓度4个方面,对其发酵条件进行优化.结果 影响LL-37-haFGF产生水平的主次因素顺序:诱导时机＞ pH值＞诱导时间＞诱导剂浓度.优化佳工艺参数为:诱导时机为A600达0.6,pH值为7.5,IPTG诱导浓度为0.8 mmol/L,诱导时间为4h,LL-37-haFGF表达量达53.7％.结论 该表达条件的优化为LL-37-haFGF的进一步功能研究和应用奠定基础.
关键词： LL-37-haFGF 大肠杆菌 正交设计 摇瓶发酵 -
新型促愈合融合多肽分子LL-37-haFGF的安全性研究
目的 融合蛋白LL-37-haFGF有明确促创面愈合效果,从体内、体外两方面评价LL-37-haFGF的安全性.方法 采用MTT法检测LL-37-haFGF对人皮肤成纤维细胞毒性影响,流式细胞仪AnnexinV/PI双标法检测人皮肤成纤维细胞凋亡的情况,根据国家SFDA 2010年《治疗用生物制品非临床安全性评价指导原则》设计皮肤急性、长期毒性试验,以及皮肤刺激性和过敏试验.结果 LL-37-haFGF不影响人皮肤成纤维细胞活力和凋亡;对皮肤无急性毒性和长期毒性,皮肤解剖结构无明显改变,主要脏器均正常;125 μg/cm2剂量对局部皮肤刺激性平均反应积分值为0,累积刺激指数为0;在125 μg/cm2剂量对皮肤平均反应值为0,致敏率为0.结论 局部应用LL-37-haFGF在本实验剂量范围内在体内、外模型上均有较高安全性.
关键词： LL-37-haFGF 皮肤 安全性 刺激性 致敏性
