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Avastin阻断VEGF促横纹肌肉瘤细胞株RH4增殖的作用
背景与目的:血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其通路的研究是目前研究的热点之一,但其在横纹肌肉瘤中的研究鲜有报道,其作用机制尚不完全清楚.本研究通过检测横纹肌肉瘤细胞株RH4中VEGF及其受体的表达情况,以了解VEGF在横纹肌肉瘤中的作用及机制,并研究Avastin阻断VEGF促细胞增殖的作用.方法:使用RT-PCR方法检测RH4细胞株中VEGF、VEGFR1、2、3 mRNA的表达;使用ELISA方法检测培养液上清中VEGF的分泌水平;使用Western blot方法检测VEGFR1蛋白的表达水平;使用直接计数的方法检测VEGF、Avastin对RH4细胞增殖的影响.结果:RT-PCR和ELISA结果显示在RH4细胞中存在VEGF的表达和分泌;在RH4细胞中仅有VEGFR1表达,VEGFR2和VEGFR3均为阴性;Western blot的结果进一步证实了VEGFR1在RH4中的表达.VEGF可直接促进RH4细胞的增殖,在0~100 ng/ml的区间其促进增殖的作用随着浓度的增加而增加.10~40μg/ml Avastin可以阻断VEGF的促增殖作用.结论:在横纹肌肉瘤细胞RH4中VEGF可以通过自分泌的方式作用于自身,并通过VEGFR1促进肿瘤细胞的增殖,Avastin可以阻断VEGF的促增殖作用.
关键词: 横纹肌肉瘤 RH4细胞株 血管内皮细胞生长因子 贝伐单抗