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NALM-6细胞株文献资料
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去C末端JAK3逆转录病毒载体对白血病细胞株NALM-6的影响
目的:了解去C末端JAK3[JAK3(△C)]基因对白血病细胞株NALM-6增殖和凋亡情况的影响,探索白血病基因治疗的新途径.方法:用逆转录病毒作为载体,将JAK3(△C)基因导入NALM-6细胞,G418筛选阳性细胞株;用免疫沉淀(IP)、SDS-PAGE电泳、Westen-blot检测JAK3(△C)对NALM-6细胞本身JAK3表达和磷酸化情况的影响;用MTT法检测NALM-6细胞和NALM-6/JAK3(△C)细胞的增殖情况,了解JAK3(△C)对NALM-6细胞增殖的影响;用流式细胞术(FCM)检测JAK3(△C)对NALM-6细胞凋亡的影响.结果:JAK3(△C)能抑制NALM-6细胞本身JAK3的磷酸化活化;从生长曲线上可以看出,稳定表达JAK3(△C)的NALM-6/JAK3(△C)细胞的增殖速率明显比NALM-6细胞阴性对照组低;从FCM图中可以看出NALM-6/JAK3(△C)细胞出现了亚G1峰(即凋亡峰),而NALM 6细胞未出现G1峰,同时NALM-6/JAK3(△C)G0/G1期细胞明显增多,而S、G2/M期细胞相对减少,而根据其相应的软件计算出的这两组细胞的增殖指数和凋亡率也存在显著差异(P＜0.05),说明导入了JAK3(△C)基因的NALM-6/JAK3(△C)细胞凋亡增加、增殖能力明显降低.结论:JAK3(△C)作为一种显性阴性分子,将为从细胞因子信号传导途径入手对白血病进行基因治疗提供一种新的途径.
