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大鼠骨形成蛋白2活性多肽/PLGA-[ASP-PEG]复合物植入异位成骨观察
目的:采用动物实验的方法评价自行研制的三嵌段材料PLGA-[ASP-PEG]与化学合成的骨形成蛋白2(BMP2)活性多肽复合物植入大鼠体内异位诱导成骨的能力.方法:成年雄性SD大鼠36只,背部消毒,切开皮肤,分离两侧肌间隙,按实验分为4组,按设计分别植入测试材料.A组:BMP2活性多肽/PLGA-[ASP-PEG]复合物组;B组:BMP2活性多肽/PLGA复合物组;C组:单纯PLGA-[ASP-PEG]组;D组:单纯PLGA组.将上述材料用环氧乙烷处理后植入大鼠背部肌肉中,分别于1周,4周,8周,12周和16周处死,进行植入物大体和组织学观察,并利用CT三维成像观察植入物成骨情况,应用荧光定量PCR检测Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)及骨桥蛋白(OPN)mRNA的表达.结果:组织学观察:A组在8周出现新骨形成;B组在12周出现新骨;C组和D组16周未见新骨形成.CT三维成像:16周时,A、B和C组均见新骨形成,骨块大小A＞B＞C组,D组未见新骨.实时定量PCR:各组均有Col-Ⅰ mRNA和OPN mRNA的表达,A组:Col-Ⅰ的Ct值为(21.67±3.21),OPN的Ct值为(21.72±5.11),与其他3组相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论:三嵌段材料PLGA-[ASP-PEG]及PLGA具有较轻的组织学反应,生物相容性好;BMP2活性多肽能明显诱导成骨;BMP2活性多肽/PLGA-[ASP-PEG]复合物具有较强的异位诱导成骨能力.
关键词： 骨形成蛋白2活性多肽 PLGA-[ASP-PEG] 三嵌段材料 异位成骨 大鼠 -
含Arg- Gly-Asp肽改性PLGA-[ASP-PEG]矿化的研究
将含Arg-Gly-Asp(RGD)肽对多孔的PLGA-[ASP-PEG]表面进行改性,然后置于仿体液中两周,探讨肽改性的PLGA-(PEG-ASP)在仿体液中的矿化情况.通过交联剂Sulfo-LC-SPDP把肽接枝到PLGA-[ASP-PEG],X射线光电子能谱仪(X-ray photoelectron spectroscopy, XPS)鉴定; 肽改性PLGA-[ASP-PEG]为实验组(Experiment group, EG),PLGA-[ASP-PEG]为对照组(Control group, CG),均置于仿体液中两周, 扫描电子显微镜(Scanning electron microscope, SEM )、X射线能谱仪(Energy dispersive analysis system of X-ray, EDS)及X射线衍射仪(X-ray diffractometry, XRD)对矿化情况进行分析.XPS检测肽改性PLGA-[ASP-PEG]表面硫元素结合能为164 eV,碳、硫元素的含量比值(C/S)为99.746∶0.1014;SEM示在EG表面及内部呈现连续的较为致密的矿化层, CG仅见分散稀疏的矿化层;EDS及XRD结果表明矿化物主要成分为羟基磷灰石,EG矿化物中钙/磷比值为1.60, CG矿化物中钙/磷比值为1.52.含RGD肽为矿化提供了丰富的功能基团,PLGA-(PEG-ASP)经肽修饰矿化后,获得了与天然骨基质相似的微观结构.
关键词： 矿化 PLGA-[ASP-PEG] 羟基磷灰石
