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二肽精氨酰-谷氨酰胺对脂多糖致肠道上皮细胞损伤的保护作用
目的 探讨二肽精氨酰-谷氨酰胺(Arg-Gln)对脂多糖(LPS)致肠道上皮细胞Caco-2炎性反应、细胞活力及屏障功能损伤的影响及其可能的机制.方法 用不含Gln的培养液加入不同水平的Arg-Gln培养Caco-2细胞24 h,同时加或不加Gln合成抑制剂——甲硫氨酸亚矾胺(MS) 4.0 mmol·L-1.然后分别进行如下实验:(1)加入LPS0.05 g.L-1,再培养24h,分别测定促炎细胞因子IL-8水平(ELISA法)、细胞活力(MTS法)变化；比较相同水平(2.5 mmol.L-1 )Arg-Gln和Gln、Arg的抗炎效果.(2)加入LPS0.4g·L-1,再培养24h,测定Caco-2细胞跨上皮电阻(TER)变化.(3)加入LPS 0.05 g·L-1再培养5h,测定细胞核因子-κB(N F-κB)及其抑制因子I-κB表达的变化(免疫印迹法).结果 与不加LPS的细胞相比,加入LPS0.05 g· L-1培养24h可显著刺激Caco-2细胞产生IL-8,抑制细胞活力(Pa＜0.05)；加MS时,大剂量LPS(0.4 g·L-1)导致TER明显下降(p＜0.05).1.25 ～5.00 mmol·L-1Arg-Gln可抑制LPS诱导的IL-8水平(P＜0.05)；同样剂量时(2.5 mmol·L-1),Gln对IL-8的抑制效果优于Arg-Gln和Arg.2.0 ～4.0 mmol·L-1 Arg-Gln明显促进LPS抑制的Caco-2细胞活力的恢复(Pa ＜0.05)；Arg-Gln可抑制LPS诱导的TER下降(P＜0.05).LPS(0.05 g·L-1)或Arg-Gln(2.0 mmol·L-1)对NF-κB和I-κB表达均无明显影响.结论 Arg-Gln可减轻LPS诱导的肠道上皮细胞屏障障碍及炎性反应,恢复细胞活力；Arg-Gln的保护机制可能与NF-κB途径无明显关系.
关键词： 二肽精氨酰-谷氨酰胺 肠道上皮细胞 炎症 屏障功能
