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琼脂糖凝胶电泳-EB文献资料
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改良凝胶电泳方法在基因多态性检测中的应用
目的 探讨改良聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)-溴化乙啶(EB)显色法在基因型多态性检测中的应用特点.方法 采用病例-对照研究方法,选取颅内出血新生儿167例作为病例组,同期因住院观察的非颅内出血的新生儿163例作为对照组,分别使用PAGE-银染、琼脂糖凝胶电泳(AGE)-EB以及PAGE-EB 3种方法进行聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析技术检测所有研究对象μ-阿片受体A118G(OPRM1 A118G)基因型,比较3种方法的应用特点.结果 PAGE-银染法及改良PAGE-EB电泳法均能清晰检测OPRM1 A118G基因型:突变纯合子GG(169 bp),突变杂合子AG(193 bp,169 bp),野生纯合子AA(193 bp),DNA片段分辨率比较差异无统计学意义(P=0.884),AGE-EB则只能检测出原始条带(193 bp),而不能准确分辨OPRM1 A118G的具体基因型.PAGE-银染法共13个步骤,需4～5h,12种化学试剂,相机采集图片,技术要求高,操作难度大,耗时;改良PAGE-EB法共6个试验步骤,历时2h,使用8种试剂,自动凝胶成像仪采集图片.结论 在基因型多态性检测中,改良PAGE-EB法简便、快捷、分辨率高,值得推广.
