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弓形虫顶端膜抗原1文献资料
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弓形虫重组质粒pBudCE4.1-AMA1-ROP18的构建及鉴定
目的 构建pBudCE4.1-AMA1-ROP18 DNA重组质粒,并对其进行克隆及鉴定.方法 采用PCR法对目的基因进行扩增,构建pBudCE4.1-AMA1 -ROP18重组质粒,转染至人包皮成纤维细胞(HFF)进行表达并用SDS-PAGE和β-actin进行鉴定.结果 经测序、双酶切和PCR鉴定,重组质粒pBudCE4.1-AMA1-ROP18构建正确;经RT-PCR和SDS-PAGE鉴定,AMA1、ROP18基因均在哺乳动物细胞中正确转录与表达.结论 成功构建pBudCFA.1 -AMA1-ROP18重组质粒,并可在HFF细胞中稳定表达.