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O9抗原文献资料
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斑点免疫金渗滤法快速检测沙门氏菌O9抗原的研究
目的利用针对沙门氏菌O9抗原单克隆抗体3-47-0和胶体金标记亲和纯化的羊抗鼠IgG, 建立一种以微孔滤膜为固相载体,快速检测沙门氏菌O9抗原的斑点免疫金渗滤法(DIGFA).方法与结果以沙门氏菌点膜,加入单抗3-47-0,洗涤后再加入胶体金标记的羊抗鼠IgG,阳性结果呈红色圆点,阴性结果无颜色,整个检测过程仅需10 min.肠炎沙门氏菌标准菌株测定该方法灵敏度为6×104CFU/点.该方法可检测所有已知含O9抗原的沙门氏菌,而不与其它沙门氏菌、肠杆菌科其他细菌和常见革兰氏阳性细菌反应.人工感染样品经前增菌和选择性增菌处理后即可进行瞬时检测.结论建立了一种快速、简便、准确检测沙门氏菌O9抗原的斑点免疫金渗滤法,在人类医学和动物医学领域有着广阔的应用前景.
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利用噬菌体展示肽库筛选和鉴定沙门氏菌O9抗原的模拟表位
目的用生物素标记沙门氏菌O9单克隆抗体(3-47-O)作为分子探针,从两个九肽噬菌体展示文库中筛选鉴定该抗体所识别的抗原模拟表位,从而为模拟多糖的多肽疫苗或编码该模拟表位的DNA疫苗研制奠定基础.方法与结果经过三轮的亲和筛选,得到了两个能与O9单抗反应的强阳性单克隆扩增物gm62和gm68,其序列分别为SHHVRGGGG和YQKWYLPKS.竞争ELISA实验表明,1010转导单位噬菌体gm68对肠炎沙门氏菌与3-47-O结合的抑制率达到65%,而噬菌体gm62的抑制率仅为20%,且gm68可以诱导产生针对沙门氏菌O9的抗体,而gm62则不能.结论实验结果显示九肽YQKWYLPKS是具有免疫原性的O9抗原模拟表位.
