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  • TRPV1通道异源表达体系的建立和功能的初步研究

    作者:李文兰;王德凤;周海玉;詹红丹;戴逸飞;周炜炜;戴丽;隋峰;霍海如

    目的:构建能够表达 TRPV1通道用于实验研究的HEK 293T细胞表达体系。方法采用脂质体转染方式将TRPV1质粒转入人胚胎肾 HEK 293T细胞,建立 TRPV1型通道瞬时异源表达体系,并对转染后的 TRPV1表达体系进行了鉴定,同时对该通道功能特性进行了研究。结果经荧光显微镜观察,转染率可达40%~50%;Western Blot研究发现转染后的 HEK 293T细胞在与 TRPV1通道蛋白相应的位置上具有明显的条带,提示 TRPV1通道蛋白在转染后的细胞中有异源性表达;共聚焦显微成像显示,转染后的 HEK 293T 细胞在受到 TRPV1通道激动剂刺激后,胞内荧光强度明显变强,提示 TRPV1通道介导钙离子功能正常。结论研究结果表明,基于 HEK 293T细胞的 TRPV1通道瞬时转染的异源表达体系成功构建。

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