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人白细胞介素7文献资料
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人白细胞介素7基因克隆及其真核表达载体的构建
目的:构建人白细胞介素7(hIL-7)的真核表达载体.方法:从人脾脏组织的总RNA中,用RT-PCR方法扩增出编码成熟hIL-7的cDNA,将其克隆于pMD18-T质粒中,并进行序列测定.再将hIL-7cDNA以正义及反义插入真核、原核双重表达载体pBK-CMV质粒,转化至大肠杆菌DH5α.后将表达的lacz-hIL-7重组蛋白行SDS-PAGE电泳,并作考马斯亮蓝染色分析,western blot鉴定.结果:hIL-7序列测定结果与预期一致.pBK-CMV-hIL-7(正义插入)的克隆表达重组蛋白,western blot证实此蛋白为IL-7.结论:成功构建了hIL-7的真核表达载体,为进一步研究hIL-7的抗肿瘤作用创造了条件.
