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全细胞性肿瘤抗原以不同方式负载树突状细胞诱导肝癌特异性T细胞反应
[目的]研究肝癌3种不同全细胞抗原负载方式(肿瘤细胞裂解物、融合以及肿瘤细胞总RNA)制备DC瘤苗的体外抗肿瘤活性.分析其体外诱导T细胞反应的异同,以期选择更好的DC瘤苗.[方法]分离肝癌患者外周血单核细胞,体外诱导DC;以上述3种抗原负载方式制备DC瘤苗(Lvs-DC、Fus-DC、RNA-DC).刺激肝癌患者淋巴细胞作为效应细胞,肝癌细胞株HepG2,为靶细胞,MTT法测定效应细胞对各肿瘤细胞的杀伤作用;分离CD8+和CD4+T细胞.瘤苗刺激后,应用IFN-γ,ELISA检测试剂盒检测CD8+T细胞IFN-γ分泌,MTT法检测各种瘤苗刺激自体CD4+T细胞增殖的能力.[结果]三种瘤苗刺激的淋巴细胞均显不对HepG2高效特异的杀伤活性,但Fus-DC-L、RNA-DC-L对HepG2的杀伤率明显高于Lys-DC-L组;Lys-DC、Fus-DC、RNA-DC刺激的CD8+T细胞组IFN-γ分泌显著高于DC刺激的CD8+T细胞组和单纯CD8+T细胞组;但Fus-DC、RNA-DC刺激组IFN-γ分泌显著高于Lys-DC刺激组;Lys-DC、Fus-DC、RNA-DC组刺激自体CD4+T胞增殖功能显著高于DC组;但Lys-DC、Fus-DC、RNA-DC刺激自体CD4+T细胞增殖功能无明显差异.[结论]肿瘤总RNA转染的DC以及融合瘤苗能更有效地诱导肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞反应,是更为有效的DC免疫治疗方式.