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EDC/sulfo-NHS文献资料
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基于EDC/sulfo-NHS的羧基化SPIO表面抗体耦联
目的:研究羧基化超顺磁性氧化铁纳米颗粒(SPIO)纳米粒子与anti-EMMPRIN单克隆抗体耦联的有效方法,考察不同pH条件下进行耦联反应的效率及anti-EMMPRIN-SPIO的粒径水平.方法:用EDC/sulfo-NHS法将anti-EMMPRIN单克隆抗体耦联到羧基化SPIO纳米粒子表面,用动态光散射法检测所得anti-EMMPRIN-SPIO的粒径,并用Bradford法和SDS-PAGE法分析不同酰胺化pH条件下的耦联效率.结果:通过EDC/sulfo-NHS的作用,anti-EMMPRIN单克隆抗体有效地耦联到羧基化SPIO表面.pH7.8时酰胺化的anti-EMMPRIN-SPIO纳米粒子的粒径小,为63.15 nm.pH6.8和pH7.3条件下酰胺化所得上清中的抗体含量较低,分别为1.943 2×10-4 g/L和3.511 1 × 10-4 g/L,SDS-PAGE凝胶图谱上可明显观察到pH6.8、pH7.3和pH7.8条件下所制备样品的谱带分别位于55 000和25 000.结论:EDC/sulfo-NHS法是anti-EMMPRIN单克隆抗体耦联于羧基化SPIO表面的有效方法.在pH6.8、pH7.3、pH7.8条件下酰胺化耦联效率较高,所制备的anti-EMMPRIN-SPIO粒径较小.pH值对EDC/sulfo-NHS介导的耦联反应的耦联效率及anti-EMMPRIN-SPIO的粒径有较大影响.
