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槐果碱拮抗酸敏感离子通道及其在大鼠缺血性脑损伤中的保护作用
目的 探讨槐果碱对酸敏感离子通道(acid-sensing ion channel,ASIC)的影响及其在缺血性脑损伤大鼠中的神经保护作用.方法 25只SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注组以及槐果碱5、10和20 mg/kg预处理组,每组5只.采用线栓法建立局灶性大鼠缺血模型,5、10和20 mg/kg槐果碱腹腔注射预处理.2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色法检测脑梗死体积,TUNEL染色法检测细胞凋亡,免疫组织化学法和Western印迹法检测ASICI和ASIC2表达.结果 脑缺血再灌注组脑梗死体积为(181.21±9.21)mm3,而5、10和20 mg/kg槐果碱预处理组分别为(150.12±6.19)、(52.31±4.20)和(32.18±3.82)mm3;脑缺血再灌注组神经功能评分为(3.62±0.36)分,而5、10和20 mg/kg槐果碱预处理组分别为(3.15±0.36)、(1.92±0.18)和(1.85±0.21)分;脑缺血再灌注组存活神经细胞仅占总细胞数(31.2±2.8)%,而5、10和20 mg/kg槐果碱预处理组分别为(51.2±3.7)%、(76.5±2.1)%和(77.1±4.1)%.与脑缺血再灌注组比较,槐果碱预处理组脑梗死体积显著缩小(P均<0.01),神经功能评分显著降低(P均<0.01),凋亡细胞数量显著减少(P均<0.01).免疫组化显示,假手术组、脑缺血再灌注组以及5、10和20mg/kg槐果碱预处理组ASICI阳性细胞数量分别为(162.5 ±8.3)、(165.1±5.3)、(138.3±7.2)、(82.1±6.3)和(69.2±5.5)个/mm2,10和20 mg/kg槐果碱预处理组ASICI显著减少(P均<0.01);Western印迹显示,假手术组、脑缺血再灌注组以及5、10和20 mg/kg槐果碱预处理组ASICI表达分别为0.58±0.08、0.61±0.10、0.42±0.07、0.12±0.03和0.19±0.02,10和20 mg/kg槐果碱预处理组显著下调(P均<0.01);ASIC2表达分别为0.51±0.06、0.58±0.11、0.49±0.05、0.55±0.03和0.51±0.11,各组之间无显著差异.结论 槐果碱可能通过下调ASICI表达对脑缺血再灌注大鼠起着神经保护作用.
