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miR-21促进脐带血间充质干细胞血管向分化的体外研究
目的:体外研究miR-21对脐带血间充质干细胞(umbilical cord blood derived mesenchymal stem cells,UCBMSCs)血管向分化的促进作用.方法:培养UCBMSCs(来源于同济大学干细胞库);构建Lenti-LacZ-Luciferase和Lenti-miR-21-Luciferase慢病毒载体;目的基因转染UCBMSCs后0、1、4、7及14d,分别采用实时荧光定量PCR及Western印迹法检测关键成血管因子的表达.用第3代UCBMSCs分别转染Lenti-LacZ-Luciferase和Lenti-miR-21-Luciferase后,接种于Matrigel上培养,显微镜下观察其管样结构形成情况.采用SPSS 13.0软件包对数据进行统计学分析.结果:成功培养脐带血骨髓间充质干细胞并成功转染目的基因;qPCR以及Western印迹法结果表明,miR-21组HIF-1α和VEGF在第4天开始显著高表达,并持续到7d和14 d;Matrigel结果显示,Lenti-miR-21-Luciferase组管状结构多,长度长.结论:MiR-21具有促进UCBMSCs血管向分化的作用.
